آماده سازی نمونه برای الکتروفورز SDS PAGE

سلام، کیفیت نمونه ای که شما برای الکتروفورز آماده می کنید بسیار بر روی نتایج نهایی شما اثر گذار است. در مرحله اول یابد سلول یا بافت خود را تخریب کنید که متد های مختلفی دارد. در این مرحله، باید از مهار کننده های شیمیایی و یک سری آنزیم ها استفاده کنید تا اثر پروتئاز ها را به حداقل برسانید. در مرحله بعدی باید پروتئین را به صورت محلول درآورید. بدین منظور باید از کائوتروپ ها، بافر و نمک هایی استفاده کنید که با الکتروفورز سازگاری داشته باشند. مرحله بعدی آلودگی زدایی و نمک زدایی است تا غلظت مورد نظر به دست آید. باید عوامل مداخله گر را که اثر منفی روی پروسه دارد حذف کنید. غلظت پروتئین را تعیین کنید و از آن غلظتی مناسب با SDS PAGE به دست آورید. نهایتا باید نمونه را در یافر مناسب رقت دهید و از آن در SDS PAGE استفاده کنید.