تکنیک ARMS-PCR

0
0

در تکنیک ARMS-PCR پرایمرهای طراحی شده برای آلل مورد بررسی فقط در یک نوکلئوتید با هم تفاوت دارند و می خواستم بدونم آیا این پرایمرها به اشتباه نمی توانند به جای هم متصل شوند؟

  • شما باید برای ارسال دیدگاه شوید
0
0

بله دقیقا احتمال همچین اتفاقی در این تکنیک بسیار زیاد است برای جلوگیری از این اتفاق و افزایش اختصاصیت واکنش ها می توانید یک mismatch اضافی نوکلئوتید سوم از سر 3 پریم پرایمر اعمال کنید و همچنین دمای چسبیدن پرایمر annealing را تا حد امکان بالا در نظر بگیرید حدودا 60 تا 66 درجه. همینطور می توانید با کاهش غلظت نمک در واکنش شرایط را سخت گیرانه کنید تا اختصاصیت افزایش یابد.

  • شما باید برای ارسال دیدگاه شوید
نمایش 1 نتیجه
پاسخ شما

لطفا جهت ثبت نام ابتدا یا ثبت نام کنید.