کلونینگ Gibson چیست؟
کلونینگ Gibson چیست؟
- شما باید برای ارسال دیدگاه وارد شوید
کلونینگ ایزوترمال، که بیشتر به عنوان مونتاژ گیبسون شناخته میشود، از خواص 3 آنزیم زیست شناسی مولکولی رایج بهره میبرد: اگزونوکلئاز، پلیمراز و لیگاز.
اگزونوکلئاز انتهای ۵ قطعات dsDNA را هضم میکند تا برآمدگیهای تکرشته انتهای 3 ایجاد شود.
DNA پلیمرازها مولکولهای DNA را با استفاده از 4 نوکلئوتید سنتز میکنند و در آخر DNA لیگاز رشتههای DNA را بهم متصل می کند.
در مونتاژ گیبسون قطعات DNA با همسانی 20-40 جفت باز در انتهای آنها به راحتی و در یک واکنش همدما قابل اتصال هستند. در ابتدا اگزونوکلئاز، انتهای 5 قطعات DNA شما را جویده و باعث ایجاد برآمدگیهای طولانی میشود که به دلیل همسان بودن با یکدیگر به هم متصل میشوند.
سپس DNA پلیمراز شکاف ایجاد شده توسط اگزونوکلئاز 5 را میبندد و در نهایت لیگاز با مهر و موم کردن DNA nicked، یک قطعه DNA دو رشته ایجاد می کند.
- مهمان ها 3 سال قبل پاسخ داد
- شما باید برای ارسال دیدگاه وارد شوید
لطفا جهت ثبت نام ابتدا وارد شوید یا ثبت نام کنید.