نتیجه استخراج
با سلام و وقت بخیر
من یک نمونه خونی حاوی EDTA رو مطابق با پروتکلی که در قسمت فیلم های آموزشی قراردادین انجام دادم ولی نتیجه حاصل جذب 260/280 رو 1.6 و جذب 260/230 رو 0.7 نشان داد و میزان استخراج 1100ng/ul بود. علت پایین بودن حذب 260/230 وجود EDTA هست؟
چه راه کاری برای بالا بردن عدد 260/230 وجود دارد؟ این عدد تا چه مقداری قابل قبول هست؟
اگر روی ژل الکتروفورز باند RNA دیده نشد استخراج مناسب نبوده؟
- sajjadmasoumi352@gmail.com 3 سال قبل سوال کرد
- شما باید برای ارسال دیدگاه وارد شوید
سلام
پایین بودن نسبت 260/230 دلایل متعددی می تواند داشته باشد از جمله: نمک، کربوهیدرات و فنول. به دلیل اینکه در ترایزول مقدار زیادی نمک گوانیدیوم تیوسیانات وجود دارد، همین خود باعث افت نسبت 260/230 میشود.
جهت افزایش این نسبت می توان چندبار رسوب RNA را در الکل 75% سرد، شستشو داد. مقدار استاندارد بین 1.7 تا 2 می باشد اما مقدار های کمتر هم قابل قبول است مثلا تا 0.8
ممکن در مراحل بعدی الودگی با RNase داشته اید. آیا Ladder شما هم باند نداد؟؟؟؟
- مهمان ها 3 سال قبل پاسخ داد
- شما باید برای ارسال دیدگاه وارد شوید
لطفا جهت ثبت نام ابتدا وارد شوید یا ثبت نام کنید.